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上海佳航Digipol-P630旋光儀-葡萄糖比旋度的測定

更新時間:2018-06-27瀏覽:7946次

一、實驗?zāi)康?/span>

  • 了解葡萄糖的比旋度和測定方法,培養(yǎng)獨立實驗?zāi)芰Γ?/span>
  • 熟悉掌握使用旋光計測定藥物比旋度的方法;
  • 了解葡萄糖比旋度在藥物研究、生產(chǎn)和使用中的意義;
  • 了解上海佳航Digipol-P630旋光儀的使用方法;

 

二、實驗原理

    葡萄糖(Glucose)(化學(xué)式C6H12O6),本品為無色結(jié)晶或白色結(jié)晶性或顆粒性粉末;無臭,味甜;在水中易溶,在乙醇中微溶。

 

    本品是機體所需能量的主要來源,有保肝作用。具有供給熱量、補充液體、促進肝解毒功能、高滲液作為脫水劑、糖耐量試驗、與胰島素合用治療高鉀血癥的作用。用于嚴重失血、失水、不能攝取食物的重病人及血糖過低癥等肺、肺水腫、眼內(nèi)壓過高、高鉀血癥等亦用之。

 

比旋度是檢查某些藥品的純度和測定含量的重要方法。直線偏振光通過含有不對稱碳原子或某些光學(xué)活性的化合物液體或溶液時,能引起旋光現(xiàn)象,使偏轉(zhuǎn)光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)。此種旋轉(zhuǎn)在一定條件下有一定的度數(shù),稱為旋光度。因旋光度受溶液濃度、管長、溫度、測定波長等影響,為比較物質(zhì)的旋光性,通常規(guī)定:偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液,在一定波長與溫度下測得的旋光度稱為比旋度(或旋光率),用[α]表示。它是每種旋光物質(zhì)*的一種物理常數(shù),在藥物分析中用以對藥物進行質(zhì)量鑒定。

 

   上海佳航旋光儀是用以測定物質(zhì)的旋光性能和旋光度大小的一種儀器,也稱旋光測定或旋偏光。是由光源、偏振鏡、樣品管、檢偏鏡和檢測器等幾個基本部件組成。光源使用鈉蒸氣燈,起偏器和檢偏器用Nicol棱鏡,起偏鏡固定不動用來產(chǎn)生面偏振光,檢偏鏡用來測定偏振光。 

 

 

 

 

1.儀器實物圖

 

2.構(gòu)造示意圖

 

3.三分視野視野圖

旋光度α除了與樣品本身的性質(zhì)有關(guān)以外,還與樣品溶液的濃度、溶劑、光線穿過的旋光管的長度、溫度及光線的波長有關(guān)情況下,溫度對旋光度測量值影響不大,通常不必使樣品置于恒溫器中。因此常用比旋光度[α]λt來表示各物質(zhì)的旋光性。在一定的波長和溫度下比旋光度[α]λt可以用下列關(guān)系式表示:

    純液體的比旋光度= [α]λt =α/(d·l)

溶液的比旋光度= [α]λt =100·α/(c·l) 

    [α]λt:表示旋光性物質(zhì)在t℃、光源的波長為λ時的比旋光度。光源的波長一般用鈉光的D線,在20℃或25℃測定。如[α]D20(水)表示某旋光化合物以水為溶劑在20℃時在鈉光的D線下所測的比旋光度; 

α:標尺盤轉(zhuǎn)動的角度讀數(shù)(即旋光度),用旋光儀測定; 

λ:光源的光波長; 

d:純液體的密度(單位:g/cm3);

l: 光路長度,即實驗中所用旋光管長度(dm

c:每100ml溶液中含有被測物質(zhì)的重量,g(按干燥品或無水物計算)

 

三、實驗材料

1、儀器:   

Digipol-P630旋光儀               1臺     膠頭滴管       1根  

容量瓶(25℃ 100ml) 1個     分析天平       1臺

稱量瓶               1個     玻璃棒         1根

量筒                 1個     濾紙、擦鏡紙   若干

2、試劑:   葡萄糖(分析純)         氨試劑

 

四、實驗步驟

1、配置溶液試樣

   在分析天平上精密稱取干燥葡萄糖樣品約10g置于燒杯中,加蒸餾水適量,充分溶解后用玻璃棒引流至100ml容量瓶,再加入0.2ml氨試劑,用蒸餾水定容至刻度,搖勻,25℃下放置15分鐘。

 

2、用蒸餾水校正儀器零點

洗凈佳航控溫管(1dm長)各部分零件,將其一端的蓋子旋緊,向管內(nèi)注入蒸餾水,取玻璃蓋片沿管口輕輕推入蓋好,再旋緊套蓋,勿使漏水或有氣泡存在。操作時不要用力過猛,以免壓碎玻璃片。用濾紙吸干佳航控溫管兩端玻璃片上的水滴,再用擦鏡紙擦去旋光管兩端玻璃片上的水汽,將佳航控溫管放入內(nèi),把溫度探頭插入控溫試管。旋光儀自帶帕爾貼控溫,把樣品控制在設(shè)定的20℃,重復(fù)操作三次,取其平均值,即為旋光儀零點,按清零鍵,即完成清零。

 

3、 測定溶液樣品的比旋度

取少量溶液試樣潤洗Digipol-P630旋光儀控溫旋光管三次,然后以此溶液試樣注滿佳航控溫旋光管,蓋好玻璃片,旋緊套蓋(檢查是否漏液、氣泡),擦凈控溫旋光管,放入Digipol-P630旋光儀內(nèi)室,參數(shù)設(shè)置選擇比旋度模式,并輸入樣品溶度按測試,儀器會自動測試出比旋度。實驗結(jié)時立即將佳航控溫管洗凈,干燥。

 

五、數(shù)據(jù)記錄和處理

 

  1. 用公式  [α]λt =100•α/(c•l)計算葡萄糖在實驗溫度下的比旋度。并與藥典規(guī)定的葡萄糖比旋度值比較。

2Digipol-P630旋光儀比旋度 數(shù)據(jù)記錄

 

葡萄糖溶液比旋度測定結(jié)果

序號

1

2

3

平均值

比旋度

+52.22

+52.18

+52.23

+52.21

 

 

六、注意事項

1、物質(zhì)的比旋度與溫度有關(guān)。對于葡萄糖,溫度每升高1°C,比旋度約減少0.1。故《中國藥典》要求比旋度的測定應(yīng)在25℃條件下進行(建議選擇像上海佳航Digipol-P630旋光儀,這種旋光儀半導(dǎo)體控溫,全自動檢測,確保測試精度。

2、旋光度的測定必須在溶液均一,穩(wěn)定的情況下進行。因為藥用葡萄糖是D-葡萄糖,而D-葡萄糖有α和β兩種互變異構(gòu)體,因而藥用葡萄糖是他們的混合物,比旋度相差甚遠,而在水溶液中逐漸平衡,稱作變旋。故加入氨試液的作用是加速D-葡萄糖的α-與β-兩種互變異構(gòu)體互變平衡的到達 。

3、供試固體葡萄糖的溶液應(yīng)不顯渾濁或含有混懸的小粒。如有上述情形時,應(yīng)預(yù)先濾 過,并棄去初濾液。

 

七、參考資料

[1] 中國藥典2010年版二部,附錄42.

[2] 中國藥典2015年版二部,1268頁.

[3] 倪青,曹岸江 主編.常用臨床藥物手冊.北京:中國醫(yī)藥科技出版社.1999.第232頁.

[4] 趙克健 主編.現(xiàn)代藥學(xué)名詞手冊.北京:中國醫(yī)藥科技出版社.2004.第49

頁.

[5] 孫寶良,李百芳,王建祺,*飛.中國醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜質(zhì).2007年1月.第24卷.第1期.

 

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